PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

Canine transmissible venereal tumors (TVT) have a high incidence in Brazil. This is partly due to the large population of stray dogs and the ineffectiveness of epidemiological control programs. This study aimed to describe the epidemiological data, clinical manifestations, and treatments used in dogs affected by TVT. Data were retrospectively collected from the 2015-2020 records of the Veterinary Hospital of the Federal Rural University of Rio de Janeiro. A total of 252 dogs were diagnosed with TVT during the study period. Of these, 81.3% were mixed-breed, 50.4% were males, and 88.9% were young or adult animals. The genital region only was affected in 77.3% of cases. Exclusively extragenital lesions were observed in 22.6% of cases. Among the animals seen, 40.1% received no treatment. Of those treated, 99.3% underwent a vincristine sulfate protocol, and in 77.2%, the treatment resulted in total remission of the neoplasm after 4 to 6 chemotherapy sessions. It was concluded that TVT is a neoplasm most often seen in mixed-breed dogs and located in the genital region, with hemorrhagic secretion being the main clinical sign reported by owners. Vincristine sulfate is currently the most used therapy, with high efficacy. However, despite the good prognosis, there was a high rate of non-adherence or abandonment of treatment, and this is an important factor to be considered and addressed by veterinarians.

• Chemotherapy dogs transmissible neoplasms transmissible venereal tumor TVT Brazil

Abstract in Portuguese:

O tumor venéreo transmissível (TVT) apresenta elevada incidência no Brasil, relacionada a elevada população de caninos errantes e a ineficácia dos programas de controle epidemiológicos. O objetivo do estudo foi descrever dados epidemiológicos, manifestação clínica e o tratamento empregado em cães acometidos pelo TVT no Hospital Veterinário da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro entre os anos de 2015 e 2020. Foram diagnosticados 252 cães com TVT durante o período do estudo, sendo 81,3% cães sem raça definida, 50,4% machos e 49,6% fêmeas, e com 88,9% animais jovens ou adultos. A região genital foi acometida em 77,3% dos casos. Lesões exclusivamente extragenitais foram observadas em 22,6% dos casos. Quanto ao tratamento, 40,1% dos cães não receberam tratamento. Entre os animais tratados, 99,3% utilizaram protocolo com sulfato de vincristina e em 77,2% o tratamento resultou em remissão total da neoplasia, com a realização de 4 a 6 sessões do quimioterápico. Conclui-se que o TVT é uma neoplasia frequentemente relacionada a cães sem raça definida, localizados na região genital, com secreção hemorrágica sendo o principal sinal clínico reportado pelos proprietários. O sulfato de vincristina é a terapia mais empregada, com alta eficácia. Entretanto, apesar de ser uma neoplasia com bom prognóstico, o alto índice de não adesão ou abandono ao tratamento representa um importante fator a ser considerado e trabalhado pelos médicos veterinários.

• Cães neoplasias transmissíveis quimioterapia TVT Brasil

Abstract in English:

This study aimed to report the hematological and biochemical changes caused by conventional and metronomic chemotherapies, using vincristine sulfate to treat canine Transmissible Venereal Tumor (TVT). Twelve dogs were selected, six of them for the group receiving conventional chemotherapy (G1), and six dogs for the group receiving metronomic chemotherapy (G2). The G1 group received vincristine sulfate once a week at the dose of 0.75mg/m² until the tumor had disappeared with treatment, and the G2 group was treated with vincristine sulfate three times a week at the dose of 0.25mg/m2 until the tumor had disappeared. Before and after chemotherapy treatment, hematological and biochemical blood tests were performed to evaluate the main alterations caused by both chemotherapeutic models. Dogs undergoing conventional chemotherapy had significant leukocyte changes (p<0.05), causing neutropenia and leukopenia. In dogs undergoing metronomic chemotherapy, leukocytes remained within the reference range. Half of the dogs in group G1 had normochromic, normocytic anemia. The only biochemical alteration observed was the increase of urea in group G2. Thus, metronomic chemotherapy for the treatment of TVT with vincristine sulfate proved to be an excellent method for treatment, with fewer adverse effects, especially in maintaining the leukogram of dogs within normal range and reducing the number of anemia in animals during treatment.

• Hematology biochemistry chemotherapy metronomic chemotherapy treatment canine transmissible venereal tumor TVT vincristine sulfate oncogenesis anemia leukopenia dogs

Abstract in Portuguese:

Esta pesquisa teve como objetivo relatar as alterações hematológicas e bioquímicas causadas pelo tratamento quimioterápico convencional e pela quimioterapia metronômica, utilizando-se sulfato de vincristina para o tratamento do tumor venéreo transmissível canino(TVTC). Foram selecionados 12 cães, sendo seis para o grupo que recebeu quimioterapia convencional (G1) e seis cães para o grupo que recebeu quimioterapia metronômica (G2). O grupo G1recebeu sulfato de vincristina, uma vez por semana, na dose de 0,75mg/m2, até o desaparecimento do tumor e o grupo G2 foi tratado com sulfato de vincristina, três vezes por semana, na dose de 0,25mg/m2, até o desaparecimento do tumor. Antes e após o tratamento quimioterápico foram realizados exames hematológicos e bioquímicos sanguíneos para avaliação das principais alterações causadas pelos dois modelos quimioterápicos. Os cães submetidos à quimioterapia convencional tiveram alterações leucocitárias significativas (p<0,05), causando uma leucopenia por neutropenia enquanto nos cães, submetidos à quimioterapia metronômica, os leucócitos mantiveram-se dentro do intervalo de referência. A metade dos cães do grupo G1 tiveram uma anemia do tipo normocítica normocrômica. A única alteração bioquímica observada foi o aumento da ureia no grupo G2. Desta forma, a quimioterapia metronômica para o tratamento do TVT com sulfato de vincristina, demonstrou ser um excelente método para a cura do animal, com menores reduções de efeitos adversos, sobretudo, na manutenção do leucograma dos cães e na redução de animais com anemia.

• Hematologia bioquímica quimioterapia quimioterapia metronômica tratamento tumor venéreo transmissível canino sulfato de vincristina oncogênese anemia leucopenia caninos

Abstract in English:

ABSTRACT.- Mascarenhas M.B., Peixoto P.V., Ramadinha R.R., Armién A.G., Costa S.Z., Miranda I.C., Nogueira V.A. & França T.N. 2017. Immunohistochemical, lectin histochemical and ultrastructural studies of canine transmissible venereal tumor in Brazil. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(6):613-620. Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, BR-465 Km 7, Seropédica, RJ 23890-000, Brazil. E-mail: mm.bezerra@yahoo.com Canine transmissible venereal tumor (CTVT) is a naturally occurring contagious round-cell neoplasia, with poorly understood origin and transmission. This study aims to further investigate the tumor nature through immunohistochemistry, lectin histochemistry and transmission electron microscopy (TEM) analysis, and to provide support for diagnostic and differential diagnoses of CTVT. Immunohistochemistry was performed in 10 genital and six exclusively extragenital tumors, which were previously diagnosed by citology and histopathology. CTVT samples were incubated with biotinylated antibodies to specific membrane and cytoplasmic antigens (anti-lysozyme, anti-macrophage, anti-vimentin, anti-CD18, monoclonal anti-CD117, monoclonal anti-CD3, polyclonal anti-CD117, polyclonal CD3 and anti-CD79a), followed by the avidin-biotin-peroxidase complex technique. The lectins Con A, DBA, SBA, PNA, UEA-1, WGA, sWGA, GSL, JSA, PSA, PHA-L, PHA-E and RCA were additionally tested in four genital CTVTs and TEM was performed in eight genital tumors. The anti-vimentin antibody revealed strong immunoreactivity to neoplastic cells in all the assessed samples (16/16). The polyclonal anti-CD3 antibodies showed moderate to strong immunoreactivity in fourteen (14/16) and the polyclonal anti-CD117 in fifteen cases (15/16). There was no immunoreactivity to anti-lysozyme, anti-macrophage, anti-CD18, monoclonal anti-CD117, monoclonal anti-CD3 and anti-CD79a antibodies. At lectin histochemistry, it was observed strong staining of tumor cells to Con-A, PHA-L and RCA. There was no histopathological and immunoreactivity differences between genital and extragenital CTVTs. These findings do not support the hypothesis of histiocytic origin of CTVT. In contrast, the lectin histochemical results were similar to cells from lymphoid/myeloid origin.

• Lectin anine transmissible venereal tumor tumor venéreo transmissível canino lectino-histoquímica

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Mascarenhas M.B., Peixoto P.V., Ramadinha R.R., Armién A.G., Costa S.Z., Miranda I.C., Nogueira V.A. & França T.N. 2017. Immunohistochemical, lectin histochemical and ultrastructural studies of canine transmissible venereal tumor in Brazil. [Estudos imuno-histoquímico, lectino-histoquímico e ultraestrutural do Tumor Venéreo Transmissível Canino no Brasil.] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(6):613-620. Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, BR-465 Km 7, Seropédica, RJ 23890-000, Brazil. E-mail: mm.bezerra@yahoo.com O Tumor Venéreo Transmissível Canino (CTVT) é uma neoplasia de células células redondas, contagiosa, com origem e transmissão ainda mal compreendidas. Com a finalidade de aprofundar a investigação sobre a natureza (origem) do TVTC, bem como fornecer subsídios para o estabelecimento do diagnóstico e diagnóstico diferencial, realizaram-se avaliações imuno-histoquímica, lectino-histoquímica e ultraestrutural de TVTC(s). A avaliação imuno-histoquímica foi feita em 10 TVTCs genitais e em 6 exclusivamente extragenitais previamente diagnosticados através de citologia e da histopatologia. Os TVTCs foram testados para reagentes específicos de antígenos de membrana e citoplasmáticos (anti-lisozima, anti-macrófago, anti-vimentina, anti-CD18, anti-CD3, anti-CD79, anti-CD117) com utilização da técnica complexo avidina-biotina-peroxidase. Adicionalmente, foram utilizadas as lectinas Con A, DBA, SBA, PNA, UEA-1, WGA, sWGA, GSL, SJA, PSA, PHA-L, PHA-E e RCA em quatro TVTCs genitais. Microscopia eletrônica foi realizada em oito TVTC genitais. Em 100% dos tumores testados (16/16) com anticorpo anti-vimentina (mono e policlonal) houve forte imuno-reatividade. Não houve reatividade para os anticorpos anti-lisozima, anti-macrófago, anti-CD18, anti-CD3, anti-CD79a e anti-CD117 quando empregamos anticorpos monoclonais, entretanto, com a utilização de anticorpos policlonais verificou-se marcação dos tumores com os anticorpos anti-CD3 e anti-CD117. Na avaliação lectino-histoquímica foi verificada forte marcação das células tumorais com Con-A, PHA-L e RCA. Não houve diferença histopatológica e de imuno-reatividade entre os TVTCs genitais e extragenitais. Estes achados não corroboram com a hipótese da origem histiocítica do CTVT (ausência de reatividade dos anticorpos anti-lisozima, anti-macrófago e anti-CD18), entretanto, os resultados da avaliação lectino-histoquímica foram em parte similares aos obtidos quando células de origem linfóide/mielóide (ConA, PHA-L e RCA) foram analisadas (Gimeno et al. 1995).

Abstract in English:

ABSTRACT.- Flórez L.M.M., Ballestero H.F., Duzanski A.P., Bersano P.R.O., Lima J.F., Cruz F.L., Mota L.S. & Rocha N.S. 2016. Immunocytochemical characterization of primary cell culture in canine transmissible venereal tumor. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(9):844-850. Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Distrito de Rubião Junior s/n, Botucatu, SP 18618-970, Brazil. E-mail: maomontoya53@yahoo.es Immunochemistry with anti-vimentin, anti-lysozyme, anti-alpha 1 antitrypsin, anti-CD3 and anti-CD79&#945; antibodies has been used for characterization of primary cell culture in the transmissible venereal tumor (TVT). Samples for primary cell culture and immunohistochemistry assays were taken from eight dogs with cytological and clinical diagnosis of TVT. To validate the immunochemical results in the primary cell culture of TVT, a chromosome count was performed. For the statistical analysis, the Mann-Whitney test with p<0.05 was used. TVT tissues and culture cells showed intense anti-vimentin immunoreactivity, lightly to moderate immunoreactivity for anti-lysozyme, and mild for anti-alpha-antitrypsin. No marking was achieved for CD3 and CD79&#945;. All culture cells showed chromosomes variable number of 56 to 68. This is the first report on the use of immunocytochemical characterization in cell culture of TVT. Significant statistic difference between immunochemistry in tissue and culture cell was not established, what suggests that the use of this technique may provide greater certainty for the confirmation of tumors in the primary culture. This fact is particularly important because in vitro culture of tumor tissues has been increasingly used to provide quick access to drug efficacy and presents relevant information to identify potential response to anticancer medicine; so it is possible to understand the behavior of the tumor.

• anine transmissible venereal tumor antitrypsin lysozyme vimentin

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Flórez L.M.M., Ballestero H.F., Duzanski A.P., Bersano P.R.O., Lima J.F., Cruz F.L., Mota L.S. & Rocha N.S. 2016. Immunocytochemical characterization of primary cell culture in canine transmissible venereal tumor.[Caracterização imunocitoquímica de culturas primárias de tumor venéreo transmissível canino.] Pesquisa Veterinária Brasileira 36(9):844-850. Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Distrito de Rubião Junior s/n, Botucatu, SP 18618-970, Brazil. E-mail: maomontoya53@yahoo.es Os anticorpos anti-vimentina, anti-lisozima, anti-alfa 1 antitripsina, anti-CD3 e anti-CD79&#945; foram empregados para a caracterização de culturas primárias de tumor venéreo transmissível canino (TVT). Amostras para cultura primária e imuno-histoquímica foram coletadas de oito cães com diagnóstico clínico e citológico de TVT. Para validar o resultado inmunocitoquímico nas culturas de TVT foi realizada a contagem de cromossomos. Para a análise estatística o teste de Mann-Whitney foi empregado a um nível de significância de p<0.05. As culturas e os tecidos de TVT apresentaram intensa reatividade para vimentina, moderada a leve para Lisozima, moderada para alfa-antitripsina e não houve marcação para CD3 e CD79&#945;. Finalmente, todas as culturas apresentaram números de cromossomos que variaram de 56 a 68. Este é o primeiro relato que apresenta o uso da immunocitoquímica para a caracterização de culturas de TVT. Assim, e devido ao fato de se observar semelhança entre a imunomarcação em células e tecidos, sugere-se que o uso desta técnica possa auxiliar na confirmação de culturas primárias do tumor, fato muito importante porque a utilização da cultura do tumor pode permitir o acesso a informação relevante sobre resposta potencial a um tratamento e conhecimento do comportamento biológico do tumor.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Mascarenhas M.B., Peixoto P.V., Ramadinha R.R., Yamasaki E.M., Costa S.Z.R., Driemeier D., Sonne L. & França T.N. 2014. Immunohistochemical study of genital and extragenital forms of canine transmissible venereal tumor in Brazil. Pesquisa Veterinária Brasileira. 34(3):250-254. Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, BR 465 km 7, Seropédica, RJ 23890-000, Brazil. E-mail: mm.bezerra@yahoo.com Aiming to provide insight and discussing the problems related to the diagnosis and differential diagnosis of canine transmissible venereal tumor (CTVT), especially in its extragenital form, immunohistochemical evaluation was performed and a comparison was established by analysis of the microscopic appearance of 10 genital CTVTs and 13 exclusively extragenital CTVTs previously diagnosed by cytology and histopathology. CTVTs samples were incubated with biotinylated antibodies raised against specific membrane (anti-macrophage) and cytoplasmic antigens (anti-lysozyme, anti-S-100 protein, anti-vimentin and anti-CD18) and subsequently developed using streptavidin-biotin peroxidase and streptavidin-biotin-alkaline phosphatase methods. A strong reactivity with the anti-vimentin antibody was found in 100% of the tumors tested (22/22). No reactivity was found for the anti-lysozyme, anti-macrophage, anti-S-100 protein and anti-CD18. No histopathological or immunoreactivity differences between genital and extragenital CTVTs were found. These findings do not corroborate the hypothesis of histiocytic origin of CTVT (no reactivity to anti-lysozyme, anti-macrophage and anti-CD 18 antibodies). In addition, the antibody panel used is useful to narrow the differential diagnosis for lymphomas, histiocytic tumors, amelanotic melanomas, and poorly differentiated epithelial neoplasias, among others.

• Canine transmissible venereal tumor tumor venéreo transmissível

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Mascarenhas M.B., Peixoto P.V., Ramadinha R.R., Yamasaki E.M., Costa S.Z.R., Driemeier D., Sonne L. & França T.N. 2014. Immunohistochemical study of genital and extragenital forms of canine transmissible venereal tumor in Brazil. [Estudo imuno-histoquímico de formas genitais e extragenitais do tumor venéreo transmissível canino no Brasil.] Pesquisa Veterinária Brasileira. 34(3):250-254. Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, BR 465 km 7, Seropédica, RJ 23890-000, Brazil. E-mail: mm.bezerra@yahoo.com Com a finalidade de fornecer subsídios e discutir os problemas referentes ao diagnóstico e ao diagnóstico diferencial do tumor venéreo transmissível canino (TVTC), principalmente em sua forma extragenital, foi realizada a avaliação imuno-histoquímica e estabelecido termo de comparação com o aspecto microscópico em 10 TVTCs genitais e em 13 exclusivamente extragenitais previamente diagnosticados através de citologia e histopatologia. Os TVTCs foram testados para reagentes específicos de antígenos de membrana (anti-macrófago) e citoplasmáticos (anti-lisozima, anti-proteína S-100, anti-alfa-1-antitripsina, anti-vimentina e anti-CD18) com a utilização da técnica complexo avidina-biotina-peroxidase e estreptavidina-biotina-fosfatase Em 100% dos tumores testados (22/22) com anticorpo anti-vimentina houve forte imuno-reatividade. Não houve reatividade para os anticorpos anti-lisozima, anti-macrófago, anti-proteína S-100 e anti-CD18. Não houve diferença histopatológica e de imuno-reatividade entre os TVTCs genitais e extragenitais. Estes achados indicam que os TVTCs avaliados não são de origem histiocítica (ausência de reatividade dos anticorpos anti-lisozima, anti-macrófago e anti-CD18). O painel de anticorpos utilizado é útil para o diagnóstico diferencial deste tumor com linfomas, tumores histiocíticos, melanomas amelanóticos e neoplasias de origem epitelial pobremente diferenciadas, entre outros.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Gerardi D.G., Tinucci-Costa M., Silveira A.C.T. & Moro J.V. 2014. Expression of P-glycoprotein, multidrug resistance-associated protein, glutathione-S-transferase pi and p53 in canine transmissible venereal tumor. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(1):71-78. Departamento de Medicina Animal, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Av. Bento Gonçalves 9090, Porto Alegre, RS 91540-000, Brazil. E-mail: daniel.gerardi@ufrgs.br The overexpression of proteins P-glycoprotein (P-gp), multidrug resistance-associated protein (MRP1), mutant p53, and the enzyme glutathione-S-transferase (GSTpi) are related to resistance to chemotherapy in neoplasms. This study evaluated the expression of these markers by immunohistochemistry in two groups of canine TVT, without history of prior chemotherapy (TVT1, n=9) and in TVTs presented unsatisfactory clinical response to vincristine sulfate (TVT2, n=5). The percentage of specimens positively stained for P-gp, MRP1, GSTpi and p53 were, respectively 88.8%, 0%, 44.5% and 22.2% in TVT1 and 80%, 0%, 80% and 0% in TVT2. In TVT1, one specimen presented positive expression for three markers and four specimens for two markers. In TVT2, three specimens expressed P-gp and GSTpi. In conclusion, the canine TVTs studied expressed the four markers evaluated, but just P-gp and GSTpi were significantly expressed, mainly at cytoplasm and cytoplasm and nuclei, respectively, either before chemotherapy as after vincristine sulfate exposure. Future studies are needed to demonstrate the function of these two markers in conferring multidrug resistance (MDR) or predict the response to chemotherapy in canine TVT.

• Transmissible venereal tumor P-glycoprotein tumor venéreo transmissível Glicoproteína-P

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Gerardi D.G., Tinucci-Costa M., Silveira A.C.T. & Moro J.V. 2014. Expression of P-glycoprotein, multidrug resistance-associated protein, glutathione-S-transferase pi and p53 in canine transmissible venereal tumor. [Expressão da glicoproteína-P, proteína associada à múltiplas drogas, glutationa-S-transferase pi e p53 no tumor venéreo transmissível canino.] Pesquisa Veterinária Brasileira 34(1):71-78. Departamento de Medicina Animal, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Av. Bento Gonçalves 9090, Porto Alegre, RS 91540-000, Brazil. E-mail: daniel.gerardi@ufrgs.br A superexpressão das proteínas glicoproteína-P (Gp-P), proteína associada à resistência à múltiplas drogas 1 (MRP1) e p53 mutante e a enzima glutationa-S-transferase pi (GSTpi) está relacionada com resistência à quimioterapia em neoplasias humanas e caninas. Este estudo avaliou a expressão, por meio da imuno-histoquímica desses marcadores em espécimes de TVT caninos sem histórico de quimioterapia prévia (TVT1, n=9) e em TVT caninos que apresentaram resposta clínica insatisfatória ao sulfato de vincristina (TVT2, n=5). A porcentagem de espécimes positivos para Gp-P, MRP1, GSTpi e p53 foram, respectivamente 88,8%, 0%, 44,5% e 22,2% no grupo TVT1 e 80%, 0%, 80% e 0% no grupo TVT2. No TVT1, um espécime apresentou expressão positiva para três marcadores e quatro para dois marcadores. No TVT2, três espécimes expressaram a Gp-P e GSTpi. Em conclusão, os TVTs caninos estudados expressaram os quatro marcadores avaliados, no entanto apenas a Gp-P e GSTpi foram significativamente expressas, principalmente no citoplasmas e no citoplasma e no núcleo, respectivamente, tanto antes da quimioterapia quanto após à exposição ao sulfato de vincristina. Estudos futuros são necessários para demonstrar a função desses dois marcadores em conferir resistência à multiplas drogas (RMD) ou predizer a resposta a quimioterapia no TVT canino.